肝肝門靜脈（iPo）注射胰腺導(dǎo)管腺癌（PDAC）腫瘤細(xì)胞來模擬肝轉(zhuǎn)移。選擇這種方法，因?yàn)檗D(zhuǎn)移是胰腺導(dǎo)管腺癌（PDAC）的早期事件，通過這個(gè)模型，可以研究巨噬細(xì)胞在肝臟轉(zhuǎn)移級(jí)聯(lián)早期（播種階段）和晚期（生長階段）中的作用。

肝臟巨噬細(xì)胞在轉(zhuǎn)移播種過程中有什么作用呢？為了清除巨噬細(xì)胞，我們使用了荷蘭Liposoma廠家的包裹有氯膦酸的脂質(zhì)體ClodronateLiposomes（CEL），在轉(zhuǎn)移挑戰(zhàn)之前給藥。包裹有氯膦酸的脂質(zhì)體ClodronateLiposomes（CEL）清除了肝臟中的庫普弗細(xì)胞（KCs）和骨髓來源的巨噬細(xì)胞（BMDMs）（圖3b-d）。然而，巨噬細(xì)胞的清除對轉(zhuǎn)移播種沒有影響。我們還測試了KCs在轉(zhuǎn)移播種中的具體作用。為此，我們向Clec4f-cre-tdTomato /-Rosa26-LSL-DTR /-（Clec4fDTR）小鼠注射了白喉毒素（DT）。同樣，KC的消耗對轉(zhuǎn)移播種也沒有影響。因此，該模型肝臟中的腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移播種可以獨(dú)立于巨噬細(xì)胞發(fā)生。

為研究腫瘤細(xì)胞與不同肝臟巨噬細(xì)胞亞群之間的細(xì)胞-細(xì)胞相互作用。我們對正常小鼠的肝臟進(jìn)行了單細(xì)胞RNA測序，并確定Clec4f作為一個(gè)差異表達(dá)基因，能夠區(qū)分肝臟常駐的Kupffer細(xì)胞（KCs）和骨髓來源的巨噬細(xì)胞（BMDMs）（下圖a–d），與先前的文獻(xiàn)一致。基于這一發(fā)現(xiàn)，我們使用Clec4f作為KC特異性標(biāo)記，利用多重免疫組化（mIHC）研究腫瘤細(xì)胞與肝臟巨噬細(xì)胞亞群之間的相互作用。種植的腫瘤細(xì)胞更常被發(fā)現(xiàn)與F4/80 BMDM接觸，而不是F4/80 Clec4f KC（下圖e–h）。此外，在已建立的轉(zhuǎn)移瘤（擴(kuò)展階段）中，BMDMs主要存在于病變內(nèi)部。相比之下，如預(yù)期的那樣，居住在肝竇中的KCs僅限于附近的肝臟組織（下圖2i–l）。因此，不同譜系的巨噬細(xì)胞亞群存在于與轉(zhuǎn)移病灶相關(guān)的空間區(qū)域，并可能在轉(zhuǎn)移過程中以不同方式與腫瘤相互作用。

巨噬細(xì)胞以前被認(rèn)為在肝臟中的轉(zhuǎn)移中起到支持作用。為了測試巨噬細(xì)胞在轉(zhuǎn)移生長階段的作用，我們在轉(zhuǎn)移種植后應(yīng)用了荷蘭Liposoma廠家的包裹有氯膦酸的脂質(zhì)體ClodronateLiposomes（CEL）以耗竭肝臟巨噬細(xì)胞。在這種情況下，巨噬細(xì)胞的耗竭顯著減少了肝臟中的腫瘤負(fù)擔(dān)。接下來我們測試了庫普弗細(xì)胞在調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)移生長中的作用。為此，Clec4fDTR小鼠在腫瘤種植后每天接受DT治療以耗竭庫普弗細(xì)胞。在該模型中，庫普弗細(xì)胞的耗竭并未影響轉(zhuǎn)移負(fù)擔(dān)。綜合以上數(shù)據(jù)，這些結(jié)果與腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞在支持轉(zhuǎn)移生長中的作用一致，而不是庫普弗細(xì)胞，這一點(diǎn)之前也曾被提出過。

Clodronate Liposomes氯膦酸鹽脂質(zhì)體清除肝臟巨噬細(xì)胞，疾病模型為：門靜脈注射PDACYFP-cells。PDAC是胰腺導(dǎo)管腺癌（Pancreatic Ductal Adenocarcinoma）的縮寫，屬于胰腺癌中常見且惡性程度高的類型，占胰腺惡性腫瘤的85%-90%。它起源于胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞，侵襲性強(qiáng)、進(jìn)展迅速，多數(shù)患者確診時(shí)已處于中晚期，5年生存率不足10%。荷蘭Liposoma巨噬細(xì)胞清除劑Clodronate Liposomes見刊于Nature Communications：Kupffer 細(xì)胞可防止小鼠胰腺導(dǎo)管腺癌轉(zhuǎn)移到肝臟。Clec4f可以區(qū)分肝臟巨噬細(xì)胞KF和骨髓來源巨噬細(xì)胞BMDM嗎？詳細(xì)類容可以見如下文獻(xiàn)。

論文信息：

論文題目：Kupffer cells prevent pancreatic ductal adenocarcinoma metastasis to the liver in mice

期刊名稱：Nature Communications

時(shí)間期卷：14, Article number: 6330 (2023)

在線時(shí)間：2023年10月10日

DOI：doi.org/10.1038/s41467-023-41771-z

產(chǎn)品信息：

貨號(hào)：C-010

規(guī)格：10ml

品牌：Liposoma

產(chǎn)地：荷蘭

名稱：Clodronate Liposomes

辦事處：Target Technology(靶點(diǎn)科技)